PRÁCTICA 02

REALIZACIÓN DE EXTENSIONES DE SANGRE PERIFÉRICA

Martes, 05 de Octubre de 2021





TÉCNICA

Portaobjetos en cuña.



OBJETIVO

Practicar la realización de extensiones de sangre periférica.



FUNDAMENTO

La extensión sanguínea se realiza recubriendo parcialmente un portaobjetos con una gota de sangre, de manera que las células se dispongan dando lugar a una monocapa uniforme. El procedimiento de obtención más habitual es mediante la técnica del portaobjetos en cuña, para la cual se necesitan dos portaobjetos de vidrio limpios de 7,5 x 2,5 cm, preferentemente de alta calidad y que tengan los bordes biselados. Uno de ellos se utilizará como soporte y el otro como extensor.


Los factores que influyen en la calidad de la extensión son:

  • Estado del portaobjetos

  • Muestra de sangre

  • Volumen de sangre utilizado

  • Anticoagulación de la sangre

  • Ejecución de la técnica

  • Distribución de la sangre por el canto del extensor

  • Ángulo del extensor

  • Velocidad de deslizamiento del extensor

  • Presión ejercida con el extensor



MUESTRAS, REACTIVOS, MATERIAL Y EQUIPOS

  • MUESTRAS

  • Sangre periférica









  • MATERIAL

  • Vaso precipitados agua + lejía (desechos)

  • Pipeta pasteur

  • Portaobjetos (4)

  • Gradilla

  • Papel de filtro

  • Rotulador permanente

  • Papel absorbente



PROCEDIMIENTO

1.- Preparar el material necesario en la zona de trabajo.


2.- Depositar una gota de sangre de aproximadamente 3 mm (10-15 µl) en el portaobjetos soporte, cerca de uno de los extremos.


3.- Colocar el portaobjetos extensor sobre el soporte, por delante de la gota de sangre, formando cuña en un ángulo de 35-45º.


4.- Deslizar el portaobjetos extensor un poco hacia atrás para que su borde entre en contacto con la gota de sangre. de esta forma la sangre se distribuye por capilaridad a lo largo del extremo del portaobjetos.


5.- Deslizar el portaobjetos extensor sobre toda la longitud del portaobjetos soporte en un movimiento rápido, suave y contínuo, manteniendo en todo momento el ángulo de 35-45º entre ambos y una presión homogénea. De esta manera, la gota de sangre se extiende uniformemente, formando una monocapa de células que ocupa, aproximadamente, entre ⅔ y ¾ de la longitud del portaobjetos soporte.


6.- Dejar secar la extensión al aire. 



RESULTADOS

He realizado un total de 12 extensiones, de las cuales 2 han sido aceptables.



OBSERVACIONES

En algunos portaobjetos el extensor se queda enganchado a los bordes al realizar la extensión. Esto puede deberse a que los portaobjetos no son de alta calidad y a que están ya muy usados.



IMÁGENES

Imagen 01. Extensión correcta.

Imagen 02. Ejemplos de extensiones de sangre no valorables.

Imagen 03. Ejemplos de extensiones de sangre no valorables.

Imagen 04. Material necesario

Imagen 05. Extensión 1 (velocidad no constante)

Extensión 2 (exceso de sangre)

Extensión 3 (exceso y parcialmente coagulada)

Imagen 06. Extensiones 10 y 11 (velocidad no constante) y extensión 12 (aceptable)

Imagen 07. Extensiones 8 y 9 (sangre no distribuída por el canto del extensor) y Extensión 7 (aceptable)

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